Что такое ИФА?
Иммуноферментный анализ в клинике
Иммуноферментный
анализ (ИФА) - лабораторное исследование основанное на высокой
избирательности и специфичности иммунологических реакций
“антиген-антитело”. Суть метода - выявление специфических антител с
помощью специальных биохимических реакций, которые помогают определить
присутствие или отсутствие антител и их количество.
Есть десятки модификаций ИФА. Его применяют для определения наличия
антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия
антител классов ( IgA IgM IgG) к антигенам различных возбудителей
болезней. Методом ИФА можно определить уровень гормонов,
иммуноглобулинов, иммунологических комплексов и других биологически
активных веществ, определить антитела к любой половой инфекции.
Материалом для исследования может служить кровь, спинномозговая
жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и т.д.
В основе иммуноферментного анализа лежит иммунная реакция антигена с антителом, а присоединение к антителам ферментной метки позволяет учитывать результат реакции антиген-антитело по появлению ферментативной активности или по изменению ее уровня.
Какие инфекции можно выявить методом ИФА
В основном ИФА применяется для диагностики сифилиса (в комплексе с другими реакциями), ВИЧ-инфекции, вирусных гепатитов. Имеет ограниченное значение для диагностики хламидийной инфекции, цитомегаловирусной инфекции и других герпетических инфекций. Метод ИФА используется также для определения антител при различных инфекционных заболеваниях, уровня гормонов, аутоантител и различных маркеров онкологических заболеваний.
Определение наличия и уровня антител в крови не рекомендуется применять для первичной диагностики инфекций, передающихся половым путем. Единственное исключение - по результатам ИФА возможно распознавание сифилиса в комплексе с реакцией микропреципитации. Но наличие антител в сыворотке крови может свидетельствовать только о контакте организма с возбудителем в данное время или ранее.
Исследование наличия и уровня антител различных классов в некоторых случаях помогает определить стадию инфекционного процесса.
К сожалению, такое важное преимущество ИФА, как количественное определение антител не имеет большого значения в практической работе - т.е. не позволяет точно установить диагноз и не влияет на дозировку и сроки назначения лекарственных средств.
Преимущества ИФА относительно других методов обнаружения антигенов и антител:
- высокая чувствительность, которая, составляющая 90%; | |
- стабильность при хранении всех ингредиентов, необходимых для проведения ИФА (год и более); | |
- быстрота и удобство проведения диагностической реакции; | |
- возможность использовать минимальные объемы исследуемого материала; | |
- возможность автоматизации всех этапов проведения реакции; | |
- небольшая стоимость диагностических наборов; | |
- возможность ранней диагностики инфекции; | |
- унифицированность и пригодность для массовых обследований; | |
- легкость в отслеживании динамики развития процесса инфекционного заболевания. |
Метод иммуноферментного анализа используется для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций и для определения наличия антител классов (IgA, IgM, IgG) к антигенам различных возбудителей (вирусные гепатиты, ВИЧ, сифилис, TORCH, хламидиозы, паразитозы). С помощью ИФА можно определить антитела к любой инфекции, при условии, что организм их выработал. Этот метод позволяет различать острые и хронические формы заболеваний, выделять стадию заболеваний и выявлять практически здоровых носителей и контролировать вакцинацию.
Для постановки диагноза по методу ИФА используют лабораторные тесты для идентификации возбудителя, инструментальные методы обследования и клиническую диагностику. Надо учитывать, что только по наличию тех или иных антител не может быть поставлен достоверный диагноз заболевания. Необходимо одновременно выявлять антитела к возбудителю методом ИФА и выявлять возбудителя методом ПЦР или другими методами.
ДИАГНОСТИКА АУТОИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Антинуклеарные антитела- это аутоантитела к антигенам ядра клеток. Они образуют иммунные комплексы и откладываются на базальных мембранах различных тканей и органов, тем самым вызывая воспаление и повреждение тканей и сосудов. Образование таких антител характерно для системных аутоиммунных заболеваний. Исследование на антинуклеарные антитела проводится если врача подозревает системное аутоиммунное заболевание.
Антитела к двухспиральной ДНК образуются при системных аутоиммунных поражениях соединительной ткани. Эти иммунные комплексы откладываются на тканях, стенках сосудов и вызывают их повреждение. Антитела к двухспиральной ДНК специфичны для системной красной волчанки.
Антитела к растворимым нуклеарным антигенам (ENA скрин) - скрининговый тест на антитела к растворимым ядерным антигенам - (SSA(Ro), SSB(La), Sm, RNP, Jo1, Scl70). Образуются при многих системных аутоиммунных заболеваниях (системная красная волчанка, синдром Шегрена, склеродермия, полимиозиты, смешанное заболевание соединительной ткани, ревматоидный артрит). Положительные значения анализа являются аргументом наличия у больного аутоиммунного процесса и является показанием для дифференцированного определения титров антител к различным ENA для более точной постановки диагноза. Для дифференцированного определения антител к растворимым ядерным антигенам применяется иммуноферментный анализ -комбинированный ENA.
Антикардиолипиновые антитела IgG, IgM - это аутоантитела к отрицательно заряженным или нейтральным фосфолипидам, фосфолипидсвязывающими сывороточными белками. Антитела к фосфолипидам нарушают нормальное функционирование эндотелия кровеносных сосудов, вызывая сужение сосудов и образование сосудистых тромбов. Обследование назначают при подозрении на антифосфолипидный синдром (рецидивирующие венозные и/или артериальные тромбозы).
Качественное и полуколичественное иммуноферментное определение специфических антител класса IgG к цитрулиновому пептиду. Тест система предназначена для диагностики ревматоидного артрита различных стадий, в т.ч. начало заболевания, когда клинические проявления слабо выражены. Эффективность теста для пациентов с клинически подтвержденным ревматоидным артритом составляет от 78 до 88%.
Ревматоидный фактор обнаруживают при ревматоидном артрите, особенно при наиболее частой и распространенной форме хронического воспаления суставов, именуемой синовиит. 75-80% больных ревматоидным артритом имеют ревматоидный фактор, однако, он не специфичен для ревматоидного артрита так как обнаруживается у здоровых лиц и при ряде других заболеваний.
С реактивный белок - маркер воспалительного процесса. Использование высоко чувствительных импортных тест-систем позволяет выявлять С реактивный белок не только при высоко активном воспалительном процессе, но при хроническом и вялотекущем.
ANCA скрин- определение аутоантител к цитоплазматическим антигенам нейтрофилов (протеиназа 3, миелопероксидаза ). Анализ назначают при подозрении на системные васкулиты, гломерулонефрит.
Все перечисленные исследования доступны в лаборатории клинической иммуногенетики института
Все вышеназванные анализы и методы диагностики доступны всем, без исключения, пациентам, обратившимся в отделение лабораторной диагностики клиники.